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紫外可見分光光度計(jì)的日常操作經(jīng)驗(yàn)

更新更新時(shí)間:2013-05-07

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    1、幾乎所有的光譜分析儀器(如紫外可見分光光度計(jì)、原子吸收分光光度計(jì)、一些儀器光度檢測(cè)器)都是依據(jù)的朗伯-比耳定律。


    
    2、很多藥品要求相對(duì)誤差在1%以內(nèi)。


    3、若石英比色皿QC的配對(duì)誤差為0.1%T,則給使用者帶來的分析誤差(△A/A)為0.5%。若QC的配對(duì)誤差為0.5%,則分析誤差為3%。


    4、檢驗(yàn)石英比色皿QC的配對(duì)誤差時(shí),QC中應(yīng)裝滿蒸餾水或溶劑。


    5、用超聲波清洗比色皿時(shí),一般用20W的清洗玻璃儀器的超聲波清洗30分鐘,就能解決題目,但盡不能用大功率超聲波來清洗比色皿,會(huì)損壞比色皿,特別是對(duì)那些用黏結(jié)方法制作的比色皿。


    6、分析測(cè)試時(shí),注進(jìn)比色皿的溶液不要太滿,一般到比色皿高度的2/3即可。


    7、一般的光電檢測(cè)器如硅光電池、光電管、光電倍增管有疲憊效應(yīng),應(yīng)避免長時(shí)間照射、預(yù)熱時(shí),打開樣品室蓋,防止光電檢測(cè)器受光疲憊。


    8、A.owen在1988年指出:“吸光度丈量的正確度,取決于儀器的SBW與試樣的自然帶寬NBW的比率。SBW/NBW≤0.1時(shí),吸光度正確度可高達(dá)99.5%。NBW≥20nm時(shí),2nm的SBW對(duì)于吸光度的正確度測(cè)試是足夠的,可滿足大約99%的日常應(yīng)用。”


    9、我國藥典規(guī)定,用于藥檢的紫外可見分光光度計(jì)的SBW一定要求≤2nm。


    10、光譜帶寬以nm計(jì),狹縫寬度以mm計(jì)。


    11、波長正確度在某種程度上,決定光度正確度。


    12、噪聲限制紫外可見分光光度計(jì)對(duì)樣品分析濃度的下限,并直接影響儀器的信噪比。雜散光直接限制被分析測(cè)試樣品濃度的上限。


    13、雜散光對(duì)參比光束和樣品光束的影響是相同的。


    14、在要求較高的分析測(cè)試工作中,紫外可見分光光度計(jì)的雜散光應(yīng)優(yōu)于0.05%,這樣可保證儀器有較寬的線性動(dòng)態(tài)范圍。


    15、W.slavin以為,雜散光通常在紫外區(qū)。實(shí)際測(cè)試時(shí),應(yīng)檢測(cè)整個(gè)光譜區(qū)的兩個(gè)端點(diǎn)的雜散光。


    16、紫外可見分光光度計(jì)的光度噪聲與掃描速度有很大關(guān)系。一般來講,掃描速度快的紫外可見分光光度計(jì)的噪聲也大。


    17、紫外可見分光光度計(jì)的基線平直度是指每個(gè)波長上的光速噪聲。測(cè)基線平直度時(shí),掃描速度用慢速。


    18、紫外可見分光光度計(jì)的線性動(dòng)態(tài)范圍取決于儀器的雜散光與噪聲。


    19、在常規(guī)分析中,對(duì)大多數(shù)試樣濃度大多取10~100ug/ml,相當(dāng)0.3~0.7Abs左右*。在試樣量答應(yīng)時(shí),試樣應(yīng)選擇靠近*吸光度值(0.434Abs)的濃度。


    20、為了得到更好的光度正確度,在分析過程中,特別要留意選擇試樣的zui大吸收峰處的波長作為測(cè)試波長。


    21、選擇光譜帶寬的原則是,在一定的實(shí)驗(yàn)條件下,測(cè)試吸光度隨光譜帶寬的變換,以獲得zui大吸光度值的光譜帶寬作為欲選擇的光譜帶寬。


    
   22、判定被測(cè)試樣是否有光解現(xiàn)象,首先要看測(cè)試數(shù)據(jù)的變化規(guī)律,對(duì)同一個(gè)試樣多次丈量,看其吸光度值是否都是向同一個(gè)方向變化,假如是,就可能有光解現(xiàn)象。
 

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